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关于印发《情形与化学工程学院BSL-1微生物实验室标准操作规程（SOP）》的通知

宣布日期：：2026-07-03 10:46 阅读次数：：

环化实验〔2026〕8号


全院教职工：：

学院连系现真相形，，，制订了《情形与化学工程学院BSL-1微生物实验室标准操作规程（SOP）》，，，且已经学院党政联席聚会审议通过，，，现印发给你们，，，请遵照执行。。。




壹号娱乐APP情形与化学工程学院

2026年5月22日





情形与化学工程学院

BSL-1微生物实验室标准操作规程（SOP）

一、总 则

（一）目的

建设实验室生物清静治理系统，，，规范实验操作流程，，，防止病原微生物走漏或实验室获得性熏染，，，包管实验职员、周围情形及公众的清静。。。

（二）适用规模

本规程适用于我院生物清静一级（BSL-1）实验室。。。该级别适用于操作已知不会对康健成人引起疾病的、对人和情形潜在�：：ψ钚〉奈⑸镆蜃樱ㄈ绶侵虏⌒源蟪Ω司�、枯草芽孢杆菌等）。。。

二、职员准入与治理

实验职员必需经由生物清静培训，，，熟悉标准微生物操作规范，，，相识潜在风险。。。所有实验事情必需在受过微生物学或相关科学训练的科学事情者监视下举行。。。实验时代限制非须要职员进入。。。儿童、孕妇、免疫低下者及无关访客不得进入。。。

三、标准微生物操作规范（焦点要求）

（一）一般行为规范

严禁在实验区内饮食、饮水、吸烟、化妆等。。。食物及个人生涯用品必需存放在指定区域（如办公室或专用储物柜），，，严禁放入实验操作区或试剂冰箱。。。不得戴手套触摸脸、手机、门把手、电梯按钮等公共区域。。。长发必需束起，，，不佩带首饰、挂件。。。严禁用口吸移液，，，必需使用移液辅助器。。。

（二）个人防护装备

1.防护服

类型要求：：长袖、扣紧式，，，材质为棉或涤棉。。。

衣着规范：：进入实验室前必需穿好，，，扣好或拉好所有扣子/拉链。。。袖子不得卷起，，，袖口应笼罩腕部。。。

脱卸与存放：：脱离实验室时连忙脱下，，，内面朝外折叠或悬挂于指定挂钩/衣架。。。不得穿实验服进入走廊、办公室、聚会室、食堂、卫生间等非实验区域。。。

洗濯与替换：：每周至少洗濯一次，，，或显着污染后连忙替换。。。污染实验服不得带回家洗濯，，，应交由实验室统一处理或送洗。。。

2.手套

选型：：一次性丁腈或乳胶手套，，，无粉为佳。。。

佩带前检查：：吹气或拉伸检查有无破损、针孔。。。

使用规范：：袖口应笼罩防护服袖口外；； ；接触活菌、样本或污染外貌后应连忙替换；； ；手套破损、显着污染后连忙摘除并洗手。。。

摘除与处理：：接纳“外翻法”摘除，，，阻止外外貌接触皮肤。。。废弃手套投入生物废弃物专用垃圾袋。。。严禁洗濯或重复使用一次性手套。。。

3.眼部防护：：在举行任何可能爆发液体飞溅或气溶胶的操作（如移液、振荡、离心、倾倒菌液）时，，，必需佩带防溅护目镜或面罩。。。

4.鞋具：：不露脚面、防滑、低跟。。。榨取穿凉鞋、拖鞋、高跟鞋、洞洞鞋进入实验室。。。

（三）操作规范

1.镌汰气溶胶与飞溅

所有操作均应审慎举行，，，包括移液、混匀、离心、接种环蘸菌等，，，应只管镌汰气溶胶和飞溅物的爆发。。。

移液：：使用微量移液器时，，，吸头笔直插入液面下，，，缓慢吸液。。。阻止强烈奏乐，，，防止爆发气泡。。�：：禾宀坏么痈叽η愕�，，，应沿容器壁缓慢加入。。。

混匀：：使用涡旋振荡器时，，，必需加盖或使用密封管。。。榨取用手强烈摇晃含菌液体的启齿容器。。。

离心：：离心前检查离心管盖是否拧紧。。。使用密封转子或加盖吊篮。。。离心竣事后静置1—2分钟再开盖。。。

接种环蘸菌：：接种环使用前后必需灼烧灭菌（如使用明火，，，需确保周围无易燃物）。。�；； ；咝卸峄�，，，阻止作育基飞溅。。。

2.锐器治理

替换原则：：优先使用塑料移液管、塑料吸头、塑料接种环等，，，只管使用一次性塑料器皿取代玻璃器皿。。。

玻璃器皿检查：：使用前检查有无裂纹、缺口、毛边。。。破损玻璃器皿不得继续使用，，，连忙弃入防穿刺锐器盒。。。

破碎玻璃处理：：不得用手直接拾取，，，使用刷子、簸箕、镊子或防刺手套网络。。。碎片弃入防穿刺锐器盒。。。

针头与注射器：：严禁回套针帽；； ；严禁拆解、弯曲、折断针头。。。使用后连忙整体弃入防穿刺锐器盒。。。

锐器盒治理：：放置于操作区域触手可及处。。。不得凌驾3/4满，，，关闭后按划定处理。。。严禁将非锐器废弃物投入锐器盒。。。

3.样本与菌种治理

所有作育物、样本和菌种容器必需有明确标识，，，至少包括名称（或编号）、日期和操作人姓名。。。样本吸收时需核对信息并检查包装完整性，，，菌种入库应挂号泉源、代次、数目和存放位置。。。样本和菌种应按要求分区存放，，，遵照“先入先出”原则取用。。。每次使用后须在响应纪录表上挂号取用日期、用途和操作人。。。菌种传代时应标注新代次，，，且不得凌驾划定最大代次。。。转移样本或菌种时，，，容器必需加盖密封并置于二级容器中；； ；若转移至外部，，，须执行三层包装并附交接单。。。逾期、用完或无需保存的样本和菌种须经高压灭菌或化学消毒后销毁，，，并在销毁纪录中挂号。。。所有纪录应可追溯，，，生涯至少2年。。。

四、消毒灭菌与废弃物处理

（一）情形消毒

1.日常消毒：：逐日事情竣事后，，，以及任何活菌物质爆发溢洒后，，，必需立纵然用有用消毒剂擦拭事情台面。。。

2.装备消毒：：离心机、作育箱、生物清静柜等装备内外貌应按期清洁消毒。。。

3.消毒剂选择：：常用75%乙醇（作用时间≥1分钟）；； ；溢洒处理使用0.1%次氯酸钠（有用氯1000ppm，，，作用时间≥10分钟）；； ；装备内外貌使用75%乙醇或季铵盐类消毒剂。。。

（二）消毒剂治理

次氯酸钠溶液现配现用，，，有用期为24小时，，，配制后应在容器上标注：：名称、浓度、配制日期、有用期、配制人。。。75%乙醇可使用预配商品。。。消毒剂应贮存于阴凉避光处，，，不得与酸、碱、还原剂混放。。。容器应密闭，，，防止挥发。。。逾期或失效消毒剂应按化学品废弃物处理，，，不得倒入下水道（大宗时）。。。

（三）废弃物处理

1.所有微生物作育物、贮存菌株及相关废弃物，，，在排放或扬弃前必需举行灭活处理（首选高压蒸汽灭菌法）。。。

2.关于需转移至其他所在举行消毒的物料，，，必需置于结实、防漏的容器内密封运输。。。

3.废弃的针头、注射器、碎玻璃等必需弃置于防穿刺锐器盒中。。。

（四）洗手

操作活菌质料后、摘除手套后、脱离实验室前，，，必需使用抗菌洗手液在洗手池彻底洗手。。。

五、设施维护与应急处理

（一）情形设施要求

1.情形维护：：实验室应便于清洁，，，地面不建议铺设地毯。。。实验台面应防水、耐热、耐酸碱及消毒剂侵蚀。。。

2.基础设施：：每个实验室应在出口处设置洗手池，，，配备洗手液、消毒液（如速干手消毒剂）等清洁用品。。。

3.标识：：实验室入口处必需张贴生物�：：Ρ晔�，，，注明实验室认真人姓名、联系电话、学校紧迫联系电话等信息。。。标识应清晰、醒目。。。

（二）事故应急处理

1.皮肤接触：：连忙脱手套，，，肥皂水/清水冲洗≥15min，，，须要时消毒。。。

2.黏膜/眼接触：：洗眼器冲洗≥15min，，，就医。。。

3.溢洒：：笼罩含氯消毒剂→作用30min→整理→消毒台面。。。

4.锐器刺伤：：挤血→冲洗→消毒→报告、挂号、就医。。。

5.报告：：所有事故连忙报告实验室认真人与实验中心。。。

六、附则

（一）本规程自宣布之日起生效。。。

（二）本规程诠释权归壹号娱乐APP情形与化学工程学院实验中心所有。。。


附件：：1.移液管和移液辅助器使用规程

      2.尖锐利器使用规程

      3.样本收支实验室操作规程

      4.洗手操作规程

      5.菌种使用操作规程



附件1


移液管和移液辅助器使用规程


在BSL-1实验室中，，，移液管和移液辅助器是用于准确转移微生物作育物、试剂或液体样本的焦点工具，，，其规范使用直接关系到实验准确性和生物清静。。。本规程基于BSL-1实验室风险品级，，，明确操作流程、清洁消毒及应急处理要求，，，适用于所有涉及微生物液体转移的实验活动。。。

一、适用规模

本规程适用于BSL-1实验室中以下场景的移液操作：：

微生物菌液、作育基的转移（如接种、稀释、分装）；； ；

含低风险微生物的液体样本处理；； ；

实验用试剂（如缓冲液、染色剂）的移取。。。

榨取使用移液管转移：：侵蚀性极强的化学试剂（如浓酸、浓碱）、易挥发有毒气体或凌驾移液管量程的液体。。。

二、操作前准备

（一）工具选择与检查

1.移液管：：凭证移液体积选择合适量程（如 1mL、5mL、10mL），，，确保无破损、刻度清晰，，，且为灭菌后专用（一次性移液管需包装完好，，，可重复使用移液管需经高压灭菌）。。。

2.移液辅助器：：检查电池电量（电动款）或吸力是否正常（手动款），，，确认毗连部位密封优异，，，外貌无污染或破损。。。

3.配套工具：：准备无菌吸头（若使用刻度移液管，，，需搭配对应的橡胶吸球或移液辅助器接口）、消鸩酒精棉片、废液缸。。。

（二）个人防护与情形准备

操作职员需按BSL-1要求衣着实验服、手套，，，若移液体积较大（如≥10mL）或可能爆发飞溅，，，需特殊佩带护目镜。。。实验台需清洁消毒，，，将移液管、移液辅助器、待移液体及吸收容器按 “就近原则” 摆放，，，阻止操作中手臂大幅移动。。。

三、移液操作方法

（一）一次性移液管与移液辅助器配合使用

1.装置移液管：：翻开一次性移液管包装（仅触碰管口非刻度端），，，将移液管顶端插入移液辅助器的接口，，，旋转牢靠（确保无松动，，，防止漏液）。。。

2.吸液操作：：手持移液辅助器，，，将移液管尖端笔直伸入待移液体中（液面下 1～2cm，，，阻止触碰容器壁）；； ；缓慢按压移液辅助器的吸液按钮（或捏下手动吸球），，，使液体缓慢上升至刻度线以上约0.5cm处，，，阻止吸空或液体进入移液辅助器内部；； ；暂停吸液，，，将移液管移出液面，，，用滤纸轻擦移液管外壁（仅擦除多余液体，，，不触碰尖端）。。。

3.调平刻度：：坚持移液管笔直，，，视线与刻度线平齐，，，缓慢释放移液辅助器按钮，，，使液体凹液面最低点与目的刻度线对齐。。。

4.放液操作：：将移液管尖端靠在吸收容器内壁（倾斜 45°角），，，缓慢按压排液按钮，，，使液体自然流出；； ；液体完全倾轧后，，，坚持移液管尖端接触容器内壁1—2 秒，，，确保无残留；； ；若为“吹出式”移液管（管口标有“吹”字），，，需按动辅助器的“吹出”按钮，，，将残留液体吹尽。。。

（二）可重复使用移液管的特殊要求

1.需经121℃高压灭菌20—30分钟后使用，，，灭菌后存放于无菌容器中，，，取用时光握移液管顶端，，，阻止污染刻度区和尖端。。。

2.吸液时必需使用移液辅助器，，，严禁用嘴吸移液管（纵然是无菌液体，，，也需阻止交织污染和误吸风险）。。。

四、操作后处理

（一）移液管处理

1.一次性移液管：：使用后连忙将尖端朝下放入含氯消毒剂（1000mg/L）的废液缸中，，，完全浸没30分钟后，，，取出放入高压灭菌袋，，，经灭菌后作为垃圾处理。。。

2.可重复使用移液管：：使用后先浸泡于含氯消毒剂（500mg/L）中30分钟，，，再用清水冲洗清洁，，，烘干后包装灭菌，，，备用。。。

（二）移液辅助器清洁与存放

1.外貌消毒：Ｔ媚课使用后，，，用75%酒精棉片擦拭移液辅助器的手柄、接口及按键，，，重点清洁可能接触液体的部位。。。

2.污染处理：：若移液历程中液体意外进入接口，，，需连忙拆开可拆卸部件，，，用 75% 酒精冲洗内部，，，晾干后再使用；； ；若污染严重，，，需整机消毒或替换部件。。。

3.存放：：清洁后将移液辅助器放置于干燥、清洁的实验台区域，，，阻止与试剂或作育物直接接触。。。

（三）实验台清洁

移液竣事后，，，用75%酒精擦拭操作区域，，，若有液体溅出，，，按BSL-1应急处理流程消毒。。。

五、注重事项

1.移液历程中坚持平稳操作，，，阻止快速吸液或排液，，，镌汰气溶胶爆发（尤其对微生物菌液）。。。

2.移液管尖端若触及非无菌外貌（如实验台、未消毒的容器外壁），，，需连忙替换新移液管，，，阻止污染样本。。。

3.差别浓度或种类的液体需使用差别移液管，，，严禁混用（如移取菌液后不可直接移取无菌试剂）。。。

4.移液辅助器需按期检查（每周1次），，，确保吸力正��、无漏液，，，电动款实时充电，，，阻止操作中止。。。

六、应急处理

1.移液管破碎：：若移液管在容器内或实验台破碎，，，连忙阻止操作，，，佩带新手套，，，用镊子夹取碎片（阻止徒手接触），，，放入锐器盒；； ；污染区域用含氯消毒剂擦拭消毒15分钟后整理。。。

2.液体走漏至移液辅助器内部：：连忙阻止使用，，，将辅助器拆开，，，用含氯消毒剂（1000mg/L）浸泡可拆卸部件30分钟，，，清水冲洗后晾干；； ；不可拆卸部分用酒精重复擦拭，，，确认无残留后再使用。。。

3.液体飞溅至皮肤/黏膜：：按BSL-1应急处理要求，，，皮肤接触用肥皂水冲洗+酒精消毒；； ；眼睛接触连忙用洗眼器冲洗15分钟，，，须要时就医。。。



附件2


尖锐利器使用规程


在BSL-1实验室中，，，尖锐利器（如针头、玻璃碎片等）若使用或处理不当，，，可能导致职员刺伤、划伤，，，甚至引发微生物间接袒露风险。。。本规程针对BSL-1实验室常见尖锐利器，，，明确其使用、处理及应急处理要求，，，旨在预防意外危险和交织污染。。。

一、适用规模

本规程适用于BSL-1实验室中所有涉及以下尖锐利器的操作：：

注射类：：一次性注射器针头、穿刺针；； ；

玻璃类：：玻璃移液管、载玻片、盖玻片、玻璃作育皿碎片；； ；

刀具类：：铰剪（刃口尖锐部分）；； ；

其他：：除以上三类外，，，具有尖锐边沿或尖端的物品。。。

二、使用前准备

（一）利器选择与检查

1.凭证实验需求选择合适类型的尖锐利器（如移液时优先使用塑料移液管，，，镌汰玻璃利器使用）；； ；

2.检查利器完整性：：玻璃制品需无裂痕、无缺口；； ；针头需无弯曲、无倒刺；； ；刀具需刃口完好，，，阻止使用破损利器。。。

3.一次性利器需包装完好、在有用期内；； ；可重复使用利器（如金属剖解针）需经灭菌处理（121℃高压灭菌20—30分钟）。。。

（二）防护与情形准备

1.必需佩带一次性手套，，，操作玻璃利器或刀具时可选择加厚手套；； ；若操作涉及液体飞溅（如用针头抽取菌液），，，需特殊佩带护目镜。。。

2.实验台需整理无关物品，，，将利器放置在稳固区域（如专用托盘内），，，阻止边沿悬空；； ；利器与待处理样本、试剂的摆放需坚持清静距离，，，防止误碰。。。

三、操作规范

（一）玻璃类利器使用

1.玻璃移液管

取用时阻止单手抓取多支，，，防止滑落破碎；； ；若需折断玻璃移液管，，，需使用专用锉刀划刻，，，并用纸巾包裹两头后折断，，，阻止徒手直接操作。。。移液历程中坚持平稳，，，若玻璃移液管接触非无菌外貌（如实验台边沿），，，需连忙阻止使用，，，按污染利器处理。。。

2.载玻片与盖玻片

放置样本时轻拿轻放，，，阻止用力按压导致碎裂；； ；染色或视察后，，，若需洗濯重复使用，，，需放入专用防漏容器（内垫软布），，，阻止相互碰撞爆发碎片。。。

（二）注射类利器使用

1.针头与注射器

仅在须要时使用（如抽取少量菌液注射至作育基），，，优先接纳无针转移手艺（如移液器）；； ；装置针头时旋转牢靠，，，阻止用力掰扯；； ；使用后连忙套上针头�；； ；っ保ń幽伞暗ナ只靥追ā�：：一手持注射器，，，另一手用镊子夹取�；； ；っ碧谆�，，，榨取双手操作）。。。严禁重复使用一次性针头，，，榨取用针头挑刺、搅拌或替换其他工具。。。

（三）刀具类（铰剪）利器使用

握持时刀刃朝向远离自身和他人的偏向，，，移动历程中坚持刃口向下；； ；剪切样本时用力匀称，，，阻止突然用力导致打滑。。。暂时不使用时，，，将刀具放置在专用刀架上，，，榨取直接放在实验台边沿。。。

（四）通用操作原则

1.榨取将尖锐利器随意转达给他人（需放在托盘内转达）；； ；榨取在实验台边沿摆弄利器；； ；

2.操作时集中注重力，，，阻止分心（如接电话、攀谈时需暂停操作，，，将利器放回清静位置）；； ；

3.若利器沾染微生物作育物，，，需先在实验台消毒区域举行外貌消毒（75% 酒精擦拭），，，再举行后续处理。。。

四、使用后处理

（一）利器网络容器要求

必需使用专用防刺穿、防走漏的锐器盒；； ；锐器盒需放置在实验台易取用且不易碰倒的位置，，，容积不凌驾 3/4 时需实时密封替换。。。

（二）分类处理流程

1.一次性利器：：使用后连忙放入锐器盒，，，榨取随手扬弃在通俗垃圾桶或水槽中。。。详细操作：：

2.针头：：无需拆卸，，，连同注射器一起放入锐器盒（若仅扬弃针头，，，需用专用针头接纳器疏散）；； ；

3.玻璃碎片：：用镊子夹�。。。ㄕト⊥绞旨袷埃�，，，放入锐器盒；； ；

4.污染刀具：：用酒精消毒后放入锐器盒（一次性）或专用灭菌容器（可重复使用）。。。

5.可重复使用利器：：使用后先浸泡于含氯消毒剂（1000mg/L）中30分钟，，，再用镊子取出，，，经高压灭菌后洗濯、烘干，，，存放于无菌容器中备用。。。

（三）锐器盒最终处理

密封后的锐器盒需标注 “灭菌日期”“处理人”，，，经121℃高压灭菌30分钟后，，，交由具备资质的医疗废弃物处理机构处理，，，处理纪录生涯至少3年。。。

五、应急处理

（一）刺伤/划伤处理

1.连忙阻止操作，，，挤出血液：：用肥皂水或流动清水冲洗伤口5—10分钟，，，从伤口近心端向远心端轻轻挤压，，，尽可能倾轧污血（榨取直接挤压伤口）；； ；

2.消毒伤口：：用75%酒精或碘伏擦拭伤口及周围皮肤，，，笼罩无菌纱布；； ；

3.报告与纪录：：连忙向实验室认真人报告，，，纪录刺伤/划伤时间、利器类型、涉及微生物种类（若有），，，并视察24—48小时，，，若泛起红肿、疼痛等症状实时就医。。。

（二）利器掉落或破碎

1.若利器掉落地面，，，榨取直接用手捡拾，，，需先在周围放置警示标识（如“小心玻璃”）；； ；

2.戴厚手套或用镊子夹取，，，若为玻璃碎片，，，可先用硬纸板网络，，，再放入锐器盒；； ；

3.污染区域用含氯消毒剂（1000mg/L）擦拭消毒2次，，，作用15分钟后整理。。。

六、治理要求

（一）专人认真

实验室需指定专人治理尖锐利器，，，按期检查锐器盒存量、容器完整性，，，确保实时替换。。。

（二）培训与审核

所有操作职员需接受尖锐利器清静使用培训，，，掌握刺伤应急处理流程，，，审核及格后方可上岗。。。

（三）镌汰使用原则

优先接纳替换工具（如塑料移液管替换玻璃移液管、清静型针头替换通俗针头），，，降低利器袒露风险。。。



附件3


样本收支实验室操作规程


在BSL-1实验室中，，，样本（包括微生物菌液、情形样本、实验后残留样本等）的收支流程直接影响实验清静性和数据准确性。。。本规程明确了样本从吸收、挂号、转达到外送的全流程规范，，，适用于所有进入或脱离BSL-1实验室的低风险样本，，，旨在预防样本污染、信息混淆及意外走漏。。。

一、样本吸收与准入

（一）核对信息

吸收样本前，，，核对申请单信息（样本编号、类型、数目、检测项目）与样本标签是否一致。。。纷歧致或破损的样本按异常处理。。。

（二）包装检查

确认样本容器为防漏材质，，，无破损、无渗漏。。。外层应有二级容器（如密封袋、带盖塑料盒）。。。

（三）外部清洁

若外包装有可见污染，，，用75%酒精或适当消毒剂擦拭外外貌，，，待干后转移。。。

（四）个人防护

操作职员需衣着实验服、佩带手套（一次性丁腈或乳胶）。。。须要时戴护目镜（如可能爆发气溶胶时）。。。

（五）挂号入库

在《样本吸收挂号表》上纪录吸收日期、样本状态、操作人。。。

二、样本内部转达与暂存

（一）转运

在实验室内移动样本时，，，必需加盖并置于稳固试管架或密封容器中。。。榨取手持无盖容器走动。。。

（二）暂存

按样本要求存放（室温、4℃或-20℃）。。。冰箱/冰柜内样本需分区存放（待检区、已检区、废弃物区），，，并明确标识，，，差别泉源的样本之间坚持距离，，，阻止交织污染。。。

（三）阻止污染

翻开样本管行动轻柔，，，在生物清静柜（若无，，，则在实验台远离职员走动区域）操作。。。用后的样本管盖应朝向桌面外侧，，，阻止内部污染桌面。。。

三、样本使用与操作

（一）镌汰气溶胶

榨取用注射器与针头混淆液体（除非须要）；； ；使用移液器缓慢吸液；； ；离心前确认离心管盖紧；； ；离心后静置1—2分钟再开盖。。。

（二）防止交织

每次只翻开一个样本管。。。差别样本使用差别加样枪头。。。操作完一个样本后，，，实时整理台面。。。

（三）实时纪录

使用后连忙在《生物样本使用纪录表》上做好纪录，，，内容包括样本唯一编号、名称、使用日期、使用人、数目、用途、剩余数目及去向等。。。

四、样本送出（含销毁或送还）

（一）灭活处理

实验后的废弃样本（如剩余作育物），，，需在实验室现场举行化学消毒（如用含氯消毒剂终浓度0.1%～0.5%浸泡30分钟）或高压灭菌（121℃，，，20—30分钟）。。。只有灭活后的样本才华作为通俗医疗废物处理。。。

（二）包装送出

如需将未灭活样本送其他部分，，，必需遵照“三层包装”原则：：

内层：：防渗漏主容器（样本管）。。。

中层：：吸收性子料（如吸水纸）包裹主容器，，，置于防漏第二容器（密封袋或带盖塑料罐）。。。

外层：：带生物�：：Ρ晔兜淖讼�。。。

外貌用消毒剂擦拭后，，，附上样本交接单。。。

（三）送还外单位

若样本需返还送检单位，，，同样执行三层包装，，，并附COA（剖析证书）及生物清静声明（说明已知为BSL-1风险品级）。。。

五、应急处理

（一）小规模溢洒（直径<10cm）

1.用吸水纸巾笼罩溢洒区。。。

2.从外围向中心倾倒适量消毒剂（如1%次氯酸钠），，，作用15分钟。。。

3.整理后再次擦拭消毒。。。

（二）个人袒露

皮肤接触样本——连忙用肥皂和流水冲洗15分钟；； ；

眼睛溅入——用洗眼器或心理盐水冲洗15分钟，，，须要时就医。。。

（三）报告

任何溢洒或袒露事务均需报告实验室认真人，，，并填写《异常事务纪录表》。。。

六、纪录与治理

所有样本的吸收、转达、外送、贮存纪录需至少生涯3年，，，电子纪录需备份。。。实验室每月对样本库存举行盘货，，，整理逾期或无用样本。。。

新入职职员需接受样本治理培训，，，审核及格后方可加入样本吸收或转达操作。。。



附件4


洗手操作规程


在BSL-1实验室中，，，手部是微生物撒播的主要途径之一。。。规范的洗手操作能有用镌汰手部携带的微生物，，，降低实验职员意外袒露风险，，，是包管个人清静和实验情形清洁的基础环节。。。本规程明确洗手的时机、方法及注重事项，，，适用于实验室所有职员在实验相关活动中的手部清洁。。。

一、适用场景

实验职员在以下情形必需严酷执行洗手操作：：

进入实验室后，，，最先实验操作前；； ；

接触微生物作育物、污染样本、实验废液或尖锐利器后；； ；

脱卸个人防护装备（如手套、实验服）后；； ；

实验操作历程中手套破损或手部被液体溅湿后；； ；

脱离实验室前；； ；

进食、饮水、触摸面部（如揉眼睛、擦鼻子）前（若在实验间隙举行此类活动，，，需先洗手并脱离实验区）。。。

二、洗手设施与用品要求

（一）设施设置

1.实验室入口或实验区周围需配备洗手池；； ；

2.洗手池水流需温顺（阻止水花飞溅），，，下方放置专用接水盆，，，排水通畅；； ；

3.配备干手装备（如一次性纸巾），，，榨取使用公用毛巾。。。

（二）清洁用品

1.可使用抗菌肥皂或抗菌洗手液，，，置于按压式容器中（阻止徒手接触皂体）；； ；

2.若实验区无水源，，，可备用75% 酒精免洗洗手液（仅作为暂时替换，，，有条件时需增补水洗）。。。

三、洗手操作方法（“七步洗手法”）

（一）湿润双手

翻开水龙头，，，用流动清水将双手（掌心、手背、指缝、指尖）完全湿润（水温以恬静为宜，，，阻止过烫）。。。

（二）涂抹肥皂或洗手液

取适量肥皂或洗手液，，，双手揉搓至爆发富厚泡沫，，，确保笼罩手部所有区域。。。

（三）七步揉搓（每步至少15秒，，，总时长≥20秒）

第一步（掌心相对）：：双手手指并拢，，，相互揉搓掌心；； ；

第二步（手背交替）：：一手掌心贴另一手手背，，，十指交织，，，相互揉搓，，，随后交流；； ；

第三步（指缝相对）：：双手掌心相对，，，十指交织，，，揉搓指缝；； ；

第四步（弯曲指枢纽）：：一手握住另一手的手指，，，旋转揉搓指枢纽及指尖（包括指甲缝），，，随后交流；； ；

第五步（拇指围绕）：：一手握住另一手的拇指，，，旋转揉搓，，，随后交流；； ；

第六步（手腕交替）：：一手揉搓另一手的手腕，，，随后交流；； ；

第七步（指尖立掌）：：双手指尖并拢，，，立在掌心处揉搓（重点清洁指甲下方）。。。

（三）冲洗清洁

用流动清水将双手彻底冲洗，，，确保肥皂泡沫完全冲净（冲洗时指尖向下，，，阻止污水倒流至手臂）。。。

（四）擦干双手

用一次性无菌纸巾按压吸干水分（从指尖到手腕，，，阻止用力摩擦），，，或使用烘手器（距离手部10～15cm，，，烘干时间≥30秒）。。。

（五）关闭水龙头

用擦手后的纸巾包裹水龙头手柄关闭，，，阻止手部再次污染。。。

四、特殊情形处理

手部有可见污染物或沾染微生物作育物必需先用流动清水和肥皂按 “七步洗手法” 洗濯，，，再用75%酒精擦拭双手（作用30秒），，，确保彻底消毒。。。无水源时的暂时清洁取用足量免洗洗手液（笼罩双手所有区域），，，按“七步洗手法” 揉搓至完全干燥（约1分钟），，，操作后尽快找到水源增补水洗。。。手部有伤口或破损洗手前需用防水创可贴完全笼罩伤口，，，操作时佩带双层手套；； ；洗手时行动轻柔，，，阻止创可贴脱落，，，洗后检查伤口防护是否完好。。。

五、注重事项

洗手历程中阻止水花溅到实验服或实验台外貌，，，若爆发溅湿，，，需用75%酒精实时擦拭消毒。。。不得用未清洁的手触碰水龙头、门把手等公共设施，，，洗后若需触碰，，，可垫用一次性纸巾。。。

按期检查洗手设施：：水龙头是否漏水、肥皂/洗手液是否富足、纸巾是否替换，，，发明问题实时报告实验室认真人。。。



附件5


菌种使用操作规程


在BSL-1实验室中，，，菌种作为焦点实验质料，，，其准确使用关于实验准确性、生物清静及实验情形维护至关主要。。。本规程适用于BSL-1实验室涉及的所有非致病性、低风险菌种的操作，，，明确从菌种获取、贮存、使用随处理各环节的规范流程，，，旨在预防菌种污染、交织撒播及意外袒露。。。

一、菌种采购与验收

（一）供应商选择

必需从具备资质、信誉优异的菌种珍藏中心（如中国通俗微生物菌种珍藏治理中心）或专业生物试剂供应商采购菌种。。。优先选用经认证、有详细特征说明及质量包管的商业化菌种。。。

（二）采购流程

采购前需明确所需菌种的学名（拉丁名）、编号、特征（如生长温度、需氧类型）及预期用途。。。填写采购申请时，，，注明生物清静品级（BSL-1适用菌种）及特殊运输要求（如冷链、防震）。。。

（三）验收要点

菌种到货后，，，连忙检查包装完整性，，，确保无走漏、破损。。�：：硕跃直昵┬畔ⅲ�、编号、代数、生产日期、保质期）与采购订简单致。。。若为冻干菌种，，，视察安瓿管是否有裂痕；； ；冻存管菌种需检查管盖密封情形。。。首次使用前，，，需举行菌种活力及纯度预验证（要领见“四、菌种苏醒与活化”）。。。

二、菌种贮存

（一）贮存设施

短期贮存（1—3个月）：：使用 4℃医用冷藏冰箱，，，内部需有明确分区（如按菌种类型、代数），，，阻止交织污染。。。

恒久贮存（＞3个月）：：接纳-80℃超低温冰箱，，，存放时将菌种置于专用冻存盒内，，，标记清晰（菌种名称、编号、冻存日期、代数）。。。超低温冰箱需按期除霜（每3—6个月1次），，，确保制冷效果。。。

（二）贮存情形监测

每月按期对冰箱内部举行清洁消毒（75%酒精擦拭），，，若发明污染，，，连忙阻止使用，，，彻底消毒后重新验证（空载运行24小时，，，监测温度稳固且无菌）。。。

三、实验前准备

（一）职员培训与资质

所有涉及菌种操作的职员需接受BSL-1实验室清静培训及菌种使用专项培训，，，审核及格后方可上岗。。。每年需加入复训，，，更新知识与手艺。。。

（二）实验情形准备

操作前30分钟开启超净事情台，，，举行紫外线照射消毒。。。使用75%酒精擦拭台面、移液器、接种环等工具外貌。。。确保实验台整齐，，，仅摆放本次实验所需物品（作育基、菌种管、移液管等）。。。

（三）作育基及试剂准备

凭证菌种特征，，，选用合适的作育基（如LB作育基用于大肠杆菌、PDA作育基用于霉菌）。。。作育基配制历程需严酷按配方操作，，，高压灭菌（121℃，，，15—20分钟）后冷却备用。。。准备无菌水、心理盐水、75% 酒精、含氯消毒剂（用于污染处理）等试剂。。。

四、菌种苏醒与活化

（一）冻干菌种苏醒

1.用75%酒精擦拭冻干菌种安瓿管外壁，，，放置于超净事情台内。。。

2.用砂轮在安瓿管颈部齐整圈，，，轻轻折断（阻止用力过猛导致玻璃碎片飞溅）。。。

3.取12mL无菌苏醒液（如液体作育基）注入安瓿管，，，轻轻振荡，，，使冻干菌种完全消融。。。

4.将消融后的菌液用无菌移液管转移至装有5～10mL液体作育基的试管中，，，轻柔混匀。。。

5.将试管置于相宜温度（按菌种特征，，，如大肠杆菌37℃）的摇床（转速 150～200rpm）或作育箱中作育18—24 小时（或按菌种说明书），，，视察菌液污浊度，，，确认菌种苏醒乐成。。。

（二）冻存管菌种活化

1.从超低温冰箱取出冻存管，，，连忙放入37℃水浴中快速解冻（一直摇晃，，，阻止局部过热，，，约1—2分钟）。。。

2.用75%酒精擦拭冻存管外壁后，，，置于超净事情台内。。。

3.翻开冻存管，，，用无菌移液管吸收适量菌液（100～200μL），，，接种至固体作育基平板（如营养琼脂平板），，，接纳四区划线法疏散单菌落（接种环需在酒精灯火焰上灼烧灭菌，，，冷却后使用）。。。

4.将平板倒置放入作育箱，，，按菌种相宜温度作育24—48小时，，，挑取单菌落举行后续实验或再次接种至液体作育基扩着述育。。。

五、菌种使用操作

（一）接种操作

1.固体作育基接种：：用灼烧冷却后的接种环挑取菌种（单菌落或菌苔），，，在固体斜面作育基上从底部向顶部划“Z”字形线，，，或在平板作育基上举行分区划线（如四区划线、连续划线），，，以获得单菌落。。。操作时，，，试管口或平板启齿需靠近酒精灯火焰（坚持 10～15cm），，，阻止杂菌污染。。。

2.液体作育基接种：：用无菌移液管吸收适量菌液（一般为液体作育基体积的1%～5%），，，缓慢注入液体作育基中，，，轻轻振荡混匀。。。若使用注射器接种，，，需选用一次性无菌注射器，，，针头装置牢靠，，，阻止液体走漏。。。

（二）作育条件控制

严酷按菌种特征设置作育温度、时间、需氧/厌氧条件等参数。。。例如，，，好氧菌作育时，，，摇床转速控制在150～200rpm；； ；厌氧菌需使用厌氧罐或厌氧作育箱，，，内部气体情形（如 N?、H?、CO?比例）切合菌种要求。。。作育箱内放置湿度计，，，坚持相对湿度50%～70%（部分对湿度敏感的菌种需严酷控制）。。。

（三）历程监测

作育历程中按期视察（至少天天1次）菌种生长情形，，，如液体作育基的污浊度、固体作育基上菌落形态（巨细、颜色、边沿、质地）。。。若发明异常（如杂菌污染、生长缓慢或障碍），，，连忙阻止作育，，，按“六、污染与异常处理”流程处理。。。

六、污染与异常处理

（一）污染判断

若作育基泛起异味、变色、污浊，，，或在固体作育基上视察到非目的菌落形态（如差别颜色、形状、质地），，，可起源判断为污染。。。通过显微镜镜检（革兰氏染色、芽孢染色等）进一步确认污染微生物类型。。。

（二）污染处理

连忙将污染的菌种及作育基放入专用的高压灭菌袋中，，，密封后经121℃、15—20分钟高压灭菌处理。。。对超净事情台、实验台外貌用含氯消毒剂（1000mg/L）擦拭消毒2次，，，每次作用15分钟。。。若污染严重（如大面积走漏），，，需暂停实验区域使用，，，举行周全清洁消毒（包括地面、墙壁），，，并对同批次贮存的其他菌种举行抽样检测，，，确认未受污染后方可恢复使用。。。

（三）异常生优点理

若菌种生长缓慢或不生长，，，检查作育条件（温度、pH、营养因素）是否准确，，，实验替换新鲜作育基或重新苏醒活化菌种。。。纪录异常情形及处理历程，，，剖析原因（如菌种退化、生涯不当），，，须要时与供应商相同追求解决方案。。。

七、菌种传代与生涯

（一）传代原则

为坚持菌种活力与特征，，，需按期传代。。。一般情形下，，，细菌每1—2个月传代1次，，，霉菌每2—3个月传代1次。。。传代次数不得凌驾划定代数（通常从冻干菌种最先，，，传代不凌驾5代），，，阻止菌种退化。。。

（二）传代操作

从作育好的菌种中挑取适量菌体（单菌落或菌液），，，按“五、菌种使用操作”中的接种要领，，，转接至新鲜作育基上作育。。。传代后的菌种需举行纯度和特征验证（如菌落形态视察、显微镜镜检、生化反映测试），，，及格后方可生涯。。。

（三）生涯要领

1.斜面低温生涯法：：将传代后生长优异的菌种接种至固体斜面作育基，，，作育至对数生恒久后，，，放入4℃冰箱生涯。。。生涯时代需按期检查（每月1次）作育基是否干裂、有无杂菌污染，，，若发明问题，，，实时重新传代生涯。。。

2.甘油冻存法：：将作育至对数生恒久的菌液与无菌甘油按1:1（v/v）混淆，，，使甘油终浓度为15%～20%。。。分装至冻存管（每管0.5～1mL），，，标注菌种名称、编号、传代日期、代数等信息，，，放入－ 80℃超低温冰箱恒久生涯。。。

八、菌种废弃物处理

（一）废弃物分类

废弃的菌种作育基、菌液、冻干管、冻存管等均属于生物废弃物。。。按�：：Τ潭确治拘苑掀铮ê罹┖退鹕诵苑掀铮ㄈ缙扑榈牟ＡО碴彻埽�。。。

（二）处理流程

熏染性废弃物需装入专用的黄色医疗废物袋，，，密封后经121℃、30分钟高压灭菌处理，，，灭菌后按通俗垃圾处理。。。损伤性废弃物（如玻璃碎片）放入防刺穿的锐器盒，，，密封后高压灭菌，，，再交由专业医疗废物处理机构处理。。。

九、治理与纪录

（一）专人治理

实验室指定专人认真菌种治理，，，包括采购、验收、贮存、使用监视及废弃物处理协调。。。治理职员需按期检查菌种库存、贮存条件及使用纪录，，，确保流程合规。。。

（二）纪录生涯

建设完善的菌种治理纪录系统，，，包括《菌种使用纪录表》等。。。并需生涯纪录表至少5年，，，以备追溯和审查。。。

（三）按期盘货

每季度对菌种库存举行盘货，，，核对菌种数目、名称、编号、代数与纪录是否一致。。。整理逾期、污染或不再使用的菌种，，，实时增补库存，，，确保实验需求。。。


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